Paenibacillus Larvae (P. Larvae) Bal Arısı (Apis Mellifera) Larvalarının Bağırsaklarını Enfekte Ederek, Bulaşıcı Ve Ölümcül American Foulbrood (Afb) Hastalığına Neden Olmaktadır. Enfeksiyonun Gelişmesi İle Larvaların İç Boşluğunda Sporlar Oluşmakta Ve Sporların Tüm Kovana Yayılması Sonucunda Kovanın Tamamının Ölümüne Yol Açmaktadır. P. Larvae Patogenezinde İlk Olarak Bakteri Kitin Parçalayıcı Protein (Plcbp49) Yardımıyla Larvanın Peritrofik Matriksini (Pm) Parçalayarak Orta Bağırsak Epiteline Saldırır Ve Devamında Bakteri İstilası Gerçekleşir. \R\N\R\Nprojenin Amacına Ulaşmak İçin İlk Etapta İnhibisyon Çalışmalarında Kullanılmak Üzere Plcbp49 Proteininin Rekombinant Üretimi Hedeflenmiştir. \R\Nbu Çalışma P. Larvae'Nin En Yaygın Genotipi Enterobacterial Repetitive İntergenic Consensus (Erıc I) Tarafından Üretilen Plcbp49 Proteininin İnhibisyonuna Yönelik Doğal İnhibitör Adaylarının Bulunmasını Amaçlanmaktadır. İlk Olarak İn-Vitro İnhibisyon Çalışmalarında Kullanılmak Üzere Plcbp49 Proteininin Escherichia Coli (E.Coli) Konak Hücresinde Rekombinant Üretimi Ve Yüksek Saflıkta Elde Edilmesi Hedeflenmiştir. \R\Nbu Doğrultuda Hedef Proteinin Üretimi İçin, Plcbp49 Geni Ticari Olarak Sentezlenmiştir. Sonrasında Proteinin İfadesi İçin Hedef Gen Alıcator Lıc Klonlama Ve Ekspresyon Kit 3 (C-Terminal His-Tag) Ekspresyon Vektör Sistemine Klonlanmış Ve E.Coli Bl21(De3) Hücrelerinde Optimize Edilen Koşullarda İfade Edilmiştir. İnhibisyon Çalışmalaırnda Kullanılmak Üzere Rekombinant His Etiketli Plcbp49 Proteini Afinite Kromatografi Yöntemi Kullanılarak %95 Üzeri Saflıkta Elde Edilmiş Ve Kullanıma Hazır Hale Getirilmiştir.
