Gliomalar Nörolojik Hücrelerden Köken Alan Birincil Beyin Tümörleridir. Bu Tümörlerin En Yaygın Ve En Malign Olanı Glioblastoma Multiformedir (Gbm). Bu Tümörün Yaygın Doğası, Proliferasyonunun Hızlı Olması, İlaca Kısa Sürede Direnç Geliştirmesi Tümörün Tedavisini Zorlaştırmaktadır. Ayrıca Kemoterapötiklerin Tümöre Ulaşımını Zorlaştıran Kan Beyin Bariyerinin (Kbb) Varlığı Da Tedaviyi Zorlaştıran Faktörlerdendir. Tümörün Tedavisi İçin Cerrahi Rezeksiyon, Radyoterapi Ve Temozolamide (Tmz) Kullanılmaktadır. Tedavi Uygulanmasına Rağmen Hastaların Sağkalım Süresi Ortalama 15 Aydır. Gbm Tedavisindeki Bu Kısıtlılıklar, Tedaviye Yönelik Yeni Terapötik Yöntemlerin Geliştirilmesini Zorunlu Kılmıştır. Eksozomlar İlaç Taşıma Özellikleri, Kbb'Den Geçebilme Yetenekleri, Düşük Toksisiteleri Ve Yapısal Kararlılıkları Sebebiyle Gbm Tedavisinde Kemoterapötik Taşınımı İçin Etkileri Araştırılan Nanotaşıyıcılardır. Bu Nanotaşıyıcıların Yüzey Yapılarının Değiştirilebilir Olması, Eksozomların Hedeflendirilerek Kemoterapötikleri Gbm Hücrelerine Daha Etkili Bir Şekilde Ulaştırmalarına Olanak Sağlamaktadır. Gbm Tedavisinde İlacın Etkisini Arttırmak İçin Kullanılabilecek Bir Başka Yöntem De Tmz İle Birlikte Tmz İle Sinerjist Çalışan Başka Bir İlacın Gbm'Ye Verilmesidir. Flavonoidler, Tmz İle Sinerjist Çalışarak Tmz'Nin Gbm Hücreleri Üzerindeki Etkisini Arttırmaktadır. Epigallokateşin-3-Gallatın (Egcg) Tmz'Nin Gbm Hücreleri Üzerindeki Etkisini Arttıran Yeşil Çaydan Elde Edilen Bir Flavonoidtir. Bu Projede M1 Makrofajlarından Elde Edilen Eksozomlara (M1-Exo) Tmz Ve Egcg İlaçları Beraber Yüklenecektir. Gbm Hücrelerinde Yüksek Düzeyde İfade Edilen Neuropilin-1 (Nrp-1) Transmembran Proteinini Hedefleyen Arginil-Glisinil-Aspartik Asit Tripeptidi (Rgd) Kullanılarak, İlaç Yüklü Eksozomlara Gbm Hücrelerini Hedefleneme Yeteneği Kazandırılacaktır. Bu Sayede Projede Tasarlanacak Olan İlaç Taşıyıcı Sistem Sayesinde Gbm'Nin Mevcut Tedavisinin Etkisinin Arttırılması Planlanmaktadır. Bu Projenin Amacı Tmz'Nin Gbm Hücreleri Üzerindeki Terapötik Etkisinin Arttırılmasıdır. \R\N\R\Nbu Projede Yükleme Yapılmamış M1 Kaynaklı Eksozomlar (M1-Exo'Lar) Grup 1 Olarak, İçine Tmz Ve Egcg İlaçlarının Birlikte Yükleneceği M1-Exo'Lar (Exo-T/E) Grup 2 Olarak, Yüzeyine Rgd Eklenerek Hedeflendirilmiş Ve İçin Tmz Ve Egcg'Nin Birlikte Yükleneceği M1-Exo'Lar (Rgd-Exo-T/E) Grup 3 Olarak, Hiçbir Taşıyıcıya Yüklenmeyecek Olan Tmz Ve Egcg İlaç Kombinasyonu (T/E) Grup 4 Olarak Ve Hiçbir Taşıyıcıya Yüklenmeyecek Olan Tmz İlacı (T) Grup 5 Olarak Adlandırılacaktır. Deneyimiz 5 Deney Grubundan Ve Sadece Pbs Kullanılacak Bir Kontrol Grubundan Oluşacaktır. Projede Kullanılacak Olan İlaç Taşıyıcı Sistemi (Grup 3) Oluşturmak İçin M1 Makrofajları, Thp-1 Hücre Hatları Olarak Satın Alınacaktır (Atcc). Kültür Edilen Thp-1 Hücreleri Santrifüjden Geçirilerek Bu Hücrelerden Eksozom Elde Edilecektir. Eksozomların Yüzey Belirteçleri İle Boyama İşlemi Gerçekleştirilerek Eksozomların Karakterizasyonu Yapılacaktır. Florenilmetoksikarbonil Sentez Metodu Kullanılarak Rgd Tripeptidi Sentezlenecektir. Rgd Tripeptitleri Sülfonil Azidin Siklodisyon Reaksiyonu İle Eksozomlara Bağlanacaktır. Elektroporasyon Yöntemi Kullanılarak Eksozomlara Tmz Ve Egcg İlaçları Yüklenecektir. Deney Grupları İn Vitro Gbm Modeli Olan U87 Hücre Hattına Verilecektir. Deney Grupları İle Muamele Edilen U87 Hücre Hatlarının Canlılık Analizi Xcelligence Cihazı İle Yapılacaktır. Bu Cihaz Kullanılarak Deney Gruplarının U87 Hücre Hattı Üzerindeki Sitotoksik Etkisi Ölçülecektir. Elde Edilen Verilerin İstatistiksel Analizi Yapılarak Çalışma Tamamlanacaktır. \R\N\R\Nbu Proje Fikri Hayata Geçirildiğinde Gbm Tedavisini İyileştirmek İçin İlaç Taşıyıcı Sistemlerin Geliştirilmesine Yönelik Gelecek Çalışmaların Da Önünü Açacağı Öngörülmektedir.
